Fatores associados à gravidade dos eventos adversos pós-vacinação contra a febre amarela durante o maior surto da doença registrado no Brasil, 2016-2017 / Factores asociados a la gravedad de los eventos adversos posvacunación contra la fiebre amarilla durante el mayor brote de la enfermedad registrado en Brasil, 2016-2017 / Factors associated with severity of adverse events following yellow fever vaccination during the biggest outbreak of the disease recorded in Brazil, 2016-2017

Resumo Objetivo: analisar características, incidência e fatores associados aos eventos adversos graves (EAGs) pós-vacinação contra febre amarela durante surto da doença no Brasil (2016-2017). Métodos: estudo de caso-controle, com dados do Sistema de Informações do Programa Nacional de Imunizações (SI-PNI); foram considerados casos os EAGs, e controles os eventos adversos não graves (EANGs). Resultados: foram analisados 135 casos de EAG e 1.058 controles; dos 135 EAGs, 79 (58,5%) eram homens, e a mediana de idade dos casos, 28 anos (intervalo interquartílico: 9-49); a incidência de EAG em janeiro de 2017 chegou a 1,3 caso por 100 mil doses aplicadas; houve associação estatística com o sexo masculino (odds ratio [OR]=1,73; IC95% 1,20;2,48), ser primovacinado (OR=1,65; IC95% 1,01;2,71), e ter idade ≥60 anos, tomando-se por referência os menores de 5 anos (OR=4,4; p-valor <0,02). Conclusão: EAG pela vacina da febre amarela apresentou maior chance de ocorrer em homens, idosos e primovacinados.

Resumen Objetivo: analizar características, incidencia y factores asociados a eventos adversos graves (EAG) posvacunación contra la fiebre amarilla durante brote de la enfermedad en Brasil (2016-2017). Métodos: estudio de caso-control, con datos del Sistema de Informaciones del Programa Nacional de Inmunizaciones (SI-PNI); se consideraron casos los EAG, y controles los eventos adversos no graves (EANG). Resultados: se analizaron 135 casos de EAG y 1.058 controles; de los 135 EAG, 79 (58,5%) eran hombres, con edad promedio de 28 años [rango intercuartílico: 9-49]; la incidência en enero de 2017 llegó a 1,3 caso por 100 mil dosis aplicadas; ocurrió asociación estadística con el sexo masculino (odds ratio [OR]=1,73 - IC95% 1,20;2,48), ser primovacunado (OR=1,65 - IC95% 1,01;2,71), y tener ≥60 años de edad tomando como referencia a los menores de 5 años (OR=4,4; p-valor <0,02). Conclusión: EAG por la vacuna de la fiebre amarilla presentó mayor probabilidad de ocurrir en hombres, ancianos y primovacunados.

Abstract Objective: to analyze characteristics, incidence and factors associated with serious adverse events (SAEs) following yellow fever vaccination during an outbreak of the disease in Brazil (2016-2017). Methods: this was a case-control study using data from the National Immunization Program Information System (SI-PNI); SAE were considered to be cases, and non-serious adverse events (NSAE) were considered to be controls. Results: we analyzed 135 SAE cases and 1,058 controls; of the 135 SAE, 79 (58.5%) were males and median age was 28 years [09-49]; incidence in January 2017 reached 1.3 case per 100,000 vaccine doses administered; there was statistical association with males (Odds Ratio [OR]=1.73 - 95%CI 1.20;2.48), primary vaccination (OR=1.65 - 95%CI 1.01;2.71), and being 60 years of age or older taking as reference those aged under 5 (OR=4.4; p-value <0.02). Conclusion: SAE owing to yellow fever vaccine showed a greater chance of occurring in men, the elderly and primary vaccination.

Prevalence and titers of yellow fever virus neutralizing antibodies in previously vaccinated adults

ABSTRACT Introduction: The World Health Organization (WHO) recommends one single dose of the Yellow Fever (YF) vaccine based on studies of antibody persistency in healthy adults. We assessed the prevalence and titers of YF virus neutralizing antibodies in previously vaccinated persons aged ≥ 60 years, in comparison to younger adults. We also evaluated the correlation between antibody titers and the time since vaccination among participants who received one vaccine dose, and the seropositivity among participants vaccinated prior to or within the past 10 years. Methods: previously vaccinated healthy persons aged ≥ 18 years were included. YF virus neutralizing antibody titers were determined by means of the 50% Plaque Reduction Neutralization Test. Results: 46 persons aged ≥ 60 years and 48 persons aged 18 to 59 years were enrolled. There was no significant difference in the prevalence of YF virus neutralizing antibodies between the two groups (p = 0.263). However, titers were significantly lower in the elderly (p = 0.022). There was no correlation between YF virus neutralizing antibody titers and the time since vaccination. There was no significant difference in seropositivity among participants vaccinated prior to or within the past 10 years. Conclusions: the clinical relevance of the observed difference in YF virus neutralizing antibody titers between the two groups is not clear.

Validation of PCR method for mycoplasma detection in the Yellow Fever-vaccine quality control / Validação de método de PCR para detecção de micoplasmas no controle de qualidade da vacina de Febre Amarela

Among the vaccines produced by Bio-Manguinhos, a major centre for manufacturing the immunobiological products in Latin America, stands out the yellow fever (YF) vaccine. To guarantee the excellence and safety of the YF vaccine, the quality control tests has to be performed throughout its production. The World Health Organization (WHO) demands the producers to guarantee the absence of Mycoplasma orale, M. pneumoniae, M. gallisepticum and M. synoviae in the biological products. Mycoplasma is a fastidious microorganism, requiring about 35 days for attaining the conclusive culturing test. In this study PCR methods were selected for amplifying 16S rRNA gene fragments for detecting mycoplasma in the intermediate products of YF vaccine. This standardized methodology was specific and sensitive to detect the low concentrations of mycoplasma in spiked intermediary vaccine products; and the absence of unspecific amplification was also demonstrated. The detection rates ranged from 3.1 to 12.5 colony forming units and showed 100 % of sensitivity and specificity in the tested samples. The PCR protocol for detecting mycoplasmal DNA in YF vaccine was validated by analysing 286 samples. Bio-Manguinhos produces annually 10,000,000 YF vaccine doses, and this method has been successfully employed, complementing the traditional approach in the mycoplasma detection since 2008.

Dentre as vacinas produzidas por Bio-Manguinhos, um importante centro de produção de imunobiológicos da América Latina, destaca-se a vacina de febre amarela (FA) que é produzida em ovos embrionados. Para garantir a excelência e a segurança da vacina, testes de controle de qualidade são realizados durante a produção. A Organização Mundial de Saúde (OMS) exige dos produtores a ausência de Mycoplasma orale, M. pneumoniae, M. gallisepticum e M. synoviae em produtos biológicos. Micoplasmas são micro-organismos fastidiosos, sendo necessários 35 dias para que os testes de cultura sejam conclusivos. Neste estudo foram selecionados métodos de amplificação de fragmentos do gene 16S rRNA para detecção de micoplasmas em produtos intermediários da vacina de FA. Esta metodologia padronizada foi capaz de detectar baixas concentrações de micoplasmas nos produtos intermediários e a ausência de amplificação inespecífica foi demonstrada. O limite de detecção variou entre 3,1 e 12,5 unidades formadoras de colônia; e nas amostras testadas a sensibilidade e a especificidade foram de 100 %. O protocolo de PCR para detecção de micoplasmas na vacina foi validado pela análise de 286 amostras. Bio-Manguinhos produz 10.000.000 doses de vacina de febre amarela por ano e, desde 2008, este método tem sido empregado com sucesso, complementando-se a abordagem tradicional.

Serologic assessment of yellow fever immunity in the rural population of a yellow fever-endemic area in Central Brazil

Introduction The yellow fever epidemic that occurred in 1972/73 in Central Brazil surprised the majority of the population unprotected. A clinical-epidemiological survey conducted at that time in the rural area of 19 municipalities found that the highest (13.8%) number of disease cases were present in the municipality of Luziânia, State of Goiás. Methods Thirty-eight years later, a new seroepidemiological survey was conducted with the aim of assessing the degree of immune protection of the rural population of Luziânia, following the continuous attempts of public health services to obtain vaccination coverage in the region. A total of 383 volunteers, aged between 5 and 89 years and with predominant rural labor activities (75.5%), were interviewed. The presence of antibodies against the yellow fever was also investigated in these individuals, by using plaque reduction neutralization test, and correlated to information regarding residency, occupation, epidemiological data and immunity against the yellow fever virus. Results We found a high (97.6%) frequency of protective titers (>1:10) of neutralizing antibodies against the yellow fever virus; the frequency of titers of 1:640 or higher was 23.2%, indicating wide immune protection against the disease in the study population. The presence of protective immunity was correlated to increasing age. Conclusions This study reinforces the importance of surveys to address the immune state of a population at risk for yellow fever infection and to the surveillance of actions to control the disease in endemic areas. .

Dengue-2 and yellow fever 17DD viruses infect human dendritic cells, resulting in an induction of activation markers, cytokines and chemokines and secretion of different TNF-α and IFN-α profiles

Flaviviruses cause severe acute febrile and haemorrhagic infections, including dengue and yellow fever and the pathogenesis of these infections is caused by an exacerbated immune response. Dendritic cells (DCs) are targets for dengue virus (DENV) and yellow fever virus (YF) replication and are the first cell population to interact with these viruses during a natural infection, which leads to an induction of protective immunity in humans. We studied the infectivity of DENV2 (strain 16681), a YF vaccine (YF17DD) and a chimeric YF17D/DENV2 vaccine in monocyte-derived DCs in vitro with regard to cell maturation, activation and cytokine production. Higher viral antigen positive cell frequencies were observed for DENV2 when compared with both vaccine viruses. Flavivirus-infected cultures exhibited dendritic cell activation and maturation molecules. CD38 expression on DCs was enhanced for both DENV2 and YF17DD, whereas OX40L expression was decreased as compared to mock-stimulated cells, suggesting that a T helper 1 profile is favoured. Tumor necrosis factor (TNF)-α production in cell cultures was significantly higher in DENV2-infected cultures than in cultures infected with YF17DD or YF17D/DENV. In contrast, the vaccines induced higher IFN-α levels than DENV2. The differential cytokine production indicates that DENV2 results in TNF induction, which discriminates it from vaccine viruses that preferentially stimulate interferon expression. These differential response profiles may influence the pathogenic infection outcome.

Caracterização da resposta vacinal antiamarílica em crianças e adultos, utilizando o modelo panorâmico de análise imunofenotípica / Characterization of yellow fever vaccine response in children and adults using the template Wide Immunophenotyping

Neste trabalho, o perfil fenotípico e de síntese de citocinas pró-inflamatórias (IFN-, TNF- e IL-12) e reguladoras (IL-4, IL-5 e IL-10) em células da imunidade inata (neutrófilos, monócitos e células NK) e adaptativa (linfócitos CD4+, linfócitos CD8+ e linfócitos CD19+) do sangue periférico de indivíduos primo e/ou revacinados com a vacina antiamarílica 17DD, bem como um caso de reação adversa à vacinação foram investigados por citometria de fluxo após cultura rápida in vitro na ausência e presença da estimulação antígeno-específica. Foram avaliados 10 adultos saudáveis, com idade entre 21 e 51 anos, em 4 tempos distintos: antes da vacinação, 7, 15 e 30 dias após primovacinação. Após cultura in vitro foi observado um perfil global de citocinas pró-inflamatórias, transiente no 7° dia, principalmente devido às células da imunidade inata, seguido por perfil misto de citocinas inflamatórias e reguladoras nos 15° e 30° dias após a vacinação antiamarílica 17DD. Em um 2º estudo, foi observada uma resposta imune adaptativa robusta, acompanhada por anormalidades na resposta do sistema imune inato em um caso de evento adverso grave, seguido à vacinação 17D.

Em adição, em um 3º estudo, foram incluídas 60 crianças com idade entre 9 e 47 meses, um ano após a primo e/ou revacinação antiamarílica 17DD, classificadas de acordo com os níveis de anticorpos neutralizantes antiamarílicos apresentados após a vacinação em: respondedoras (médios ou altos títulos de anticorpos neutralizantes), não respondedoras, respondedoras após revacinação e um grupo de crianças não vacinadas. Os dados da avaliação do impacto dos antígenos vacinais 17DD no perfil das citocinas dos leucócitos periféricos destas crianças demonstraram que, na presença de títulos médios de anticorpos neutralizantes após a primovacinação, o estímulo por antígenos vacinais 17DD in vitro foi capaz de induzir um perfil balanceado de citocinas pró-inflamatórias e reguladoras, envolvendo células da imunidade inata e adaptativa, enquanto que uma assinatura polarizada reguladora foi observada no grupo de crianças primovacinadas não respondedoras e uma assinatura proeminente pró-inflamatória no grupo de crianças que apresentaram títulos altos de anticorpos neutralizantes após a primovacinação. Em conjunto os dados sugerem que uma resposta imune predominantemente do tipo balanceada, com síntese de citocinas pró-inflamatórias e reguladoras, envolvendo tanto células da imunidade inata quanto da imunidade adaptativa parece ser essencial para a indução de uma resposta imune efetiva e segura após a vacinação antiamarílica

Caracterização da resposta vacinal antiamarílica em crianças e adultos, utilizando o modelo panorâmico de análise imunofenotípica

Neste trabalho, o perfil fenotípico e de síntese de citocinas pró-inflamatórias (IFN-, TNF- e IL-12) e reguladoras (IL-4, IL-5 e IL-10) em células da imunidade inata (neutrófilos, monócitos e células NK) e adaptativa (linfócitos CD4+, linfócitos CD8+ e linfócitos CD19+) do sangue periférico de indivíduos primo e/ou revacinados com a vacina antiamarílica 17DD, bem como um caso de reação adversa à vacinação foram investigados por citometria de fluxo após cultura rápida in vitro na ausência e presença da estimulação antígeno-específica. Foram avaliados 10 adultos saudáveis, com idade entre 21 e 51 anos, em 4 tempos distintos: antes da vacinação, 7, 15 e 30 dias após primovacinação. Após cultura in vitro foi observado um perfil global de citocinas pró-inflamatórias, transiente no 7° dia, principalmente devido às células da imunidade inata, seguido por perfil misto de citocinas inflamatórias e reguladoras nos 15° e 30° dias após a vacinação antiamarílica 17DD. Em um 2º estudo, foi observada uma resposta imune adaptativa robusta, acompanhada por anormalidades na resposta do sistema imune inato em um caso de evento adverso grave, seguido à vacinação 17D.

Em adição, em um 3º estudo, foram incluídas 60 crianças com idade entre 9 e 47 meses, um ano após a primo e/ou revacinação antiamarílica 17DD, classificadas de acordo com os níveis de anticorpos neutralizantes antiamarílicos apresentados após a vacinação em: respondedoras (médios ou altos títulos de anticorpos neutralizantes), não respondedoras, respondedoras após revacinação e um grupo de crianças não vacinadas. Os dados da avaliação do impacto dos antígenos vacinais 17DD no perfil das citocinas dos leucócitos periféricos destas crianças demonstraram que, na presença de títulos médios de anticorpos neutralizantes após a primovacinação, o estímulo por antígenos vacinais 17DD in vitro foi capaz de induzir um perfil balanceado de citocinas pró-inflamatórias e reguladoras, envolvendo células da imunidade inata e adaptativa, enquanto que uma assinatura polarizada reguladora foi observada no grupo de crianças primovacinadas não respondedoras e uma assinatura proeminente pró-inflamatória no grupo de crianças que apresentaram títulos altos de anticorpos neutralizantes após a primovacinação. Em conjunto os dados sugerem que uma resposta imune predominantemente do tipo balanceada, com síntese de citocinas pró-inflamatórias e reguladoras, envolvendo tanto células da imunidade inata quanto da imunidade adaptativa parece ser essencial para a indução de uma resposta imune efetiva e segura após a vacinação antiamarílica

Doença viscerotrópica aguda por vacina da febre amarela / Acute viscerotropic disease after yellow fever vaccine

A febre amarela consiste em uma doença viral aguda que é uma condição endêmica na África e na América do Sul. A vacinação é a única maneira eficaz de proteção contra a doença, visto que confere imunidade por pelo menos dez anos, podendo se estender pela vida inteira. Um dos eventos adversos da vacinação para a febre amarela é a doença viscerotrópica aguda, que se caracteriza por uma síndrome íctero-hemorrágica. No presente trabalho são relatados dois casos desta doença

Yellow fever is an acute viral disease which is endemic in Africa and South America. Vaccination is the only effective way to protect against the disease, since it confers immunity for at least ten years and may extend for a lifetime. One of the adverse events of vaccination for yellow fever is acute viscerotropic disease, characterized by icterohemorrhagic syndrome. In this paper we report two cases of this disease

Membrane and envelope virus proteins co-expressed as lysosome associated membrane protein (LAMP) fused antigens: a potential tool to develop DNA vaccines against flaviviruses

Vaccination is the most practical and cost-effective strategy to prevent the majority of the flavivirus infection to which there is an available vaccine. However, vaccines based on attenuated virus can potentially promote collateral side effects and even rare fatal reactions. Given this scenario, the developent of alternative vaccination strategies such as DNA-based vaccines encoding specific flavivirus sequences are being considered. Endogenous cytoplasmic antigens, characteristically plasmid DNA-vaccine encoded, are mainly presented to the immune system through Major Histocompatibility Complex class I - MHC I molecules. The MHC I presentation via is mostly associated with a cellular cytotoxic response and often do not elicit a satisfactory humoral response. One of the main strategies to target DNA-encoded antigens to the MHC II compartment is expressing the antigen within the Lysosome-Associated Membrane Protein (LAMP). The flavivirus envelope protein is recognized as the major virus surface protein and the main target for neutralizing antibodies. Different groups have demonstrated that co-expression of flavivirus membrane and envelope proteins in mammalian cells, fused with the carboxyl-terminal of LAMP, is able to induce satisfactory levels of neutralizing antibodies. Here we reviewed the use of the envelope flavivirus protein co-expression strategy as LAMP chimeras with the aim of developing DNA vaccines for dengue, West Nile and yellow fever viruses.

A vacinação é a estratégia mais prática e o melhor custo-benefício para prevenir a maioria das infecções dos flavivirus, para os quais existe vacina disponível. Entretanto, as vacinas baseadas em vírus atenuados podem potencialmente promover efeitos colaterais e, mais raramente, reações fatais. Diante deste cenário, o desenvolvimento de estratégias alternativas de vacinação, como vacinas baseadas em DNA codificando seqüências específicas dos flavivirus, está sendo considerado. Antí-genos citoplasmáticos endógenos, caracteristicamente codificados por vacinas de DNA plasmidial, são majoritariamente apresentados ao sistema imune através de moléculas do Complexo Maior de Histocompatibilidade de classe I - MHC I. A via de apresentação MHC I é mais associada à resposta celular citotóxica e, frequentemente, não elicita uma resposta humoral satisfatória. Uma das principais estratégias para direcionar antígenos codificados pelas vacinas de DNA para o compartimento MHC II é expressar estes antígenos dentro da Proteína de Associação à Membrana Lisossomal (LAMP). A proteína do envelope dos flavivirus é reconhecidamente a principal proteína de superfície viral e o principal alvo para anticorpos neutralizantes. Diferentes grupos têm demonstrado que a co-expressão das proteínas de membrana e do envelope dos flavivirus em células de mamíferos, fusionada com a porção carboxi-terminal de LAMP, é capaz de induzir níveis satisfatórios de anticorpos neutralizantes. Neste trabalho revisamos a estratégia de co-expressão da proteína do envelope dos flavivírus, como quimeras de LAMP, com o objetivo de desenvolver vacinas de DNA contra a febre do Oeste do Nilo, dengue e febre amarela.

Anticuerpos neutralizantes contra el virus de la fiebre amarilla 17 D en colombianos vacunados y no vacunados con inmunidad a dengue / Yellow fever virus 17D neutralising antibodies in vaccinated Colombian people and unvaccinated ones having immunity against dengue

Objetivo Determinar la frecuencia de título protector de anticuerpos neutralizantes contra el virus de la fiebre amarilla (AN-VFA a título >1:10) en colombianos vacunados con la cepa 17 D y conocer la magnitud de neutralización del VFA por anticuerpos contra dengue. Metodología Se colectó suero de 100 individuos con vacuna documentada por carné y de 116 residentes en municipios de Norte de Santander afectados por el brote en 2002-2003, quienes informaron haber sido vacunados. Se incluyeron sueros de individuos no vacunados con (n=61) y sin (n=16) anticuerpos contra dengue. Todos los sueros se analizaron por la prueba de neutralización para VFA por 75 por ciento de reducción de placa. Resultados AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 90 por ciento de vacunados con carné y sin variación aparente en relación con edad. Al contrario, hubo correlación entre disminución de la frecuencia de título protector de anticuerpos e incremento del tiempo de inmunización (r=0,95; p=0,04). En residentes de Norte de Santander, AN-VFA a título >1:10 se encontraron en 92,6 por ciento adultos y 69 por ciento niños. El VFA fue neutralizado (52 -100 por ciento) por sueros de inmunes a dengue más eficientemente que por sueros de no inmunes (p<0.001). Conclusiones Vacunados con el virus 17 D podrían no estar protegidos contra fiebre amarilla: hasta 31 por ciento niños y 10 por ciento adultos. Anticuerpos contra dengue inhibieron el VFA y su significancia en términos de protección contra fiebre amarilla deberá ser investigada.

Objective Determining the frequency of yellow fever seroprotective antibody neutralising titres (YF-NT >1:10) in Colombians vaccinated with the 17 D virus and ascertaining the extent to which YF virus can be neutralised by dengue antibodies. Materials and Methods Serum samples were taken from 100 subjects who showed their vaccination record and from 116 residents in municipalities (Norte de Santander) affected by a wild YF outbreak in 2002-2003 who were reported to have been YF vaccinated. Sera from individuals with (n=61) and without (n=16) dengue antibodies who had never been YF vaccinated were included. All the sera were tested by 75 percent YF plaque-reduction neutralization test. Results YF-NT titres >1:10 were founded in 90 percent of subjects with vaccination recorded with minors variations in relation to age. In contrast, there was correlation between decrease of seroprotective YF-NT titres frequency and increase of immunization time (r=0.95; p=0.04). In residents in YF endemic area, YF-NT titres > 1.10 were founded in 92,6 percent adults and 69 percent children. YF 17 D virus was neutralized (52-100 percent) by dengue sera more efficiently than non-dengue immune sera (p<0.001). Conclusions Individuals immunised with YF vaccine 17 D could not be protected against YF: up to 31 percent children and 10 percent adults. Dengue antibodies inhibited YF virus and its significance in terms of YF protection must be investigated.

Evaluación de cobertura y del nivel de información en la campaña de vacunación contra la fiebre amarilla, Cusco,Perú, 2005 / Evaluation of Coverage and Knowledge Levels during a Vaccination Campaign against Yellow Fever, Cusco-Perú, 2005

Introducción: la fiebre amarilla (FA) es enzootica en Cusco, siendo un serio problema social de salud pública. Para enfrentar el problema se elaboro el Plan Nacional de Prevención y Control de la FA, cuyo objetivo fue vacunar a toda la población del país mayor de 1 año, en 4 etapas (2004-2007); habiéndose previsto vacunar en la ciudad del Cusco a 306 160 personas entre noviembre 2004-febrero 2005. La cobertura final oficial reportada fue del 83.5%. Objetivo del estudio fue evaluar la cobertura de vacunación y el nivel de información y comunicación de la campaña. Material y método: estudio descriptivo, transversal y prospectivo realizado en la ciudad del Cusco, marzo 2005; por muestreo aleatorio estratificado; 954 personas fueron consideradas para evaluar la cobertura vacunal (CV); y 386 personas para evaluar los demás objetivos. Resultados: se evidenció que la CV contra la FA en Cusco fue del 64,04%. Las personas vacunadas, no tienen un conocimiento adecuado acerca de: que es FA (76,7%), el tiempo en que hace efecto la vacuna (84,9%), tiempo de protección de la vacuna (92,2%), contraindicaciones para la vacunación (65,2%). 58% de las personas vacunadas se informaron de la campaña de vacunación por la radio y 25% por la televisión. Solo 0,27% de los vacunados recuerda por lo menos uno de los mensajes principales de la campaña.Conclusiones: la evaluación de la CV evidenció que no se alcanzaron las metas establecidas para la campaña de vacunación, existiendo discrepancias entre lo reportado oficialmente (83,5%) y los resultados del estudio (64,04%). La población vacunada no fue debidamente informada acerca de la vacuna y la campaña de vacunación contra la FA, lo que pone en cuestión si es posible seguir implementando campañas sanitarias que afecten ciertos principios bioéticos básicos.

IIntroduction: Yellow Fever (YF) is enzootic in Cusco, and it is a serious public health problem. A National Plan for Control and Prevention of YF was implemented, aiming at vaccinating the whole Peruvian population above 1 year of age in four stages (2004–2007); and it was expected to vaccinate all of Cusco city inhabitants (306,160 persons in this age group) between November 2004 and February 2005. The final coverage reported was 83.5%. The objective of the study was to assess vaccination coverage and knowledge and communication levels of this campaign. Methods: A descriptive, cross-sectional, and prospective study was performed in Cusco in March 2005, using a stratified and randomized sampling technique. 954 people were interviewed in order to assess vaccination coverage and 386 for other objective measures. Results: Vaccination coverage against yellow fever in Cusco was 64.04%. Vaccinated people did not have good knowledge of: what yellow fever is (76.7%), how is it transmitted (50.9%), time in which the vaccine starts to exert its effect (84.9%), duration of the protective effect of the vaccine (92.2%), and contraindications for vaccination (65.2%). Only 0.27% remembered at least one of key messages of the campaign. Conclusions: This assessment showed that the goals for coverage in this vaccination campaign were not achieved; there were large differences between official reports (83.5%) and the results form our survey (64.04%). Immunized population was not adequately informed about the yellow fever vaccine and its vaccination campaign, which leads to question the benefits of performing campaigns affecting some basic bioethical principles.

Dengue-yellow fever sera cross-reactivity; challenges for diagnosis / Reacción cruzada en sueros de Fiebre Amarilla y Dengue: desafíos para el diagnóstico

Objective The Flavivirus genera share epitopes inducing cross-reactive antibodies leading to great difficulty in differentially diagnosing flaviviral infections. This work was aimed at evaluating the complexity of dengue and yellow fever serological differential diagnosis. Material and methods Dengue antibody capture ELISA and a yellow fever neutralisation test were carried out on 13 serum samples obtained from yellow fever patients, 20 acute serum samples from dengue patients and 19 voluntan/ serum samples pre- and post-vaccination with YF vaccine. Results Dengue ELISA revealed IgM reactivity in 46,2 percent of yellow fever patients and 42 percent of vaccinees. Sixteen out of 20 dengue patients (80 percent) had high YF virus neutralisation titres. Conclusions . Such very high cross-reactivity data challenged differential laboratory diagnosis of dengue and yellow fever in áreas where both flaviviruses co-circulate. New laboratory strategies are thus needed for improving the tests and providing a specific laboratory diagnosis. Cross-reactivity between Flaviviruses represents a great difficulty for epidemiological surveillance and preventing dengue, both of which demand urgent attention.

Objetivo Los miembros del genero Flavivirus poseen epítopes inductores de anticuerpos de reactividad cruzada, lo que representa una gran dificultad en el diagnostico diferencial. En este trabajo nos propusimos evaluar la complejidad del diagnostico diferencial entre dengue y fiebre amarilla. Materiales y métodos Ensayos de ELISA de captura para dengue y de neutralización para fiebre amarilla fueron realizados en 13 muestras de suero de pacientes con fiebre amarilla, 20 muestras de pacientes con dengue en fase aguda y 19 voluntarios sanos antes y después de ser vacunados para la fiebre amarilla. Resultados Los ensayos de ELISA para IgM contra dengue mostraron reactividad cruzada en el 46,2 por ciento de los pacientes con fiebre amarilla y 42 por ciento de los vacunados. Dieciséis de los 20 pacientes con Dengue (80 por ciento) tuvieron altos títulos de anticuerpos neutralizantes para fiebre amarilla. Conclusión La alta reactividad cruzada que se encontró, representa un desafío para el diagnostico diferencial del dengue y fiebre amarilla en áreas donde co-circulan estos Flavivirus. Nuevas estrategias de diagnóstico de laboratorio son necesarias para suministrar un diagnóstico especifico. La reactividad cruzada entre Flavivirus representa un gran problema para la vigilancia epidemiológica, control y prevención del dengue, el cual debe ser solucionado.

Estudo da resposta imunológica após a vacinação contra a febre amarela / Study of the immune response after vaccination against the yellow fever

A vacina de FA é considerada uma das mais seguras e eficientes vacinas virais atenuadas, mas pouco se conhece sobre a sua resposta imunológica. Neste estudo 33 voluntários foram vacinados para analisar as respostas imunológicas humoral e celular, tendo em foco parâmetros que pudessem, futuramente, contribuir à compreensão de mecanismos imunológicos responsáveis por eventos adversos graves pós-vacinais. Amostras sangüíneas de 22 primovacinados e 11 revacinados foram coletadas antes da vacinação até 60 dias pós-vacinação. O nível de anticorpos neutralizantes dos dois grupos de voluntários apresentou aumentos significativos até o décimo quinto dia pós-vacinação, atingindo níveis similares 15 dias depois. As taxas de células T, B e NK estavam elevadas nos primovacinados, sendo que uma ativação significativa de células T CD4+ e CD8+ ocorreu em ambos os grupos por volta do sexagésimo dia, ambos com relevância estatística. Células T CD4+CD45RO+ e CD8+CD45RO+ apresentaram aumento percentual significativo nos primovacinados no trigésimo dia, atingindo níveis similares aos apresentados pelos revacinados. A pesquisa de citocinas foi feita pelas técnicas de ELISPOT e por citometria de fluxo após marcação intracelular. Por ELISPOT, houve aumento de células produtoras de IFN-gama e IL-4 estimuladas pelo vírus 17DD, atingindo níveis máximos 15 dias pós-vacinação, com maior produção para IFN-gama que para IL-4. Na marcação intracelular, células T CD4+IFN-gama+, T CD4+TNF-alfa+, CD8+IFN-gama+ e CD8TNF-alfa+ apresentaram aumento significativo nos primovacinados, no dia 15 pós-vacinação, em relação às células controle. Células T CD8+IFN-gama+ e CD4+IL-4+ tiveram a produção das citocinas aumentadas significativamente em relação ao dia 0, retornando aos níveis pré-vacinais no trigésimo dia pós-vacinação. O perfil imunológico após a imunização contra FA se mostrou característico de infecções virais com resposta de anticorpo eficiente, ativação de linfócitos CD4 e CD8 inclusive de ...

Lymphocyte subset analyses in healthy adults vaccinated with yellow fever 17DD virus

In this study the kinetics of humoral and cellular immune responses in first-time vaccinees and re-vaccinees with the yellow fever 17DD vaccine virus was analyzed. Flow cytometric analyses were used to determine percentual values of T and B cells in parallel to the yellow fever neutralizing antibody production. All lymphocyte subsets analyzed were augmented around the 30th post vaccination day, both for first-time vaccinees and re-vaccinees. CD3+ T cells increased from 30.8 percent (SE ± 4 percent) to 61.15 percent (SE ± 4.2 percent), CD4+ T cells from 22.4 percent (SE ± 3.6 percent) to 39.17 percent (SE ± 2 percent) with 43 percent of these cells corresponding to CD4+CD45RO+ T cells, CD8+ T cells from 15.2 percent (SE ± 2.9 percent) to 27 percent (SE ± 3 percent) with 70 percent corresponding to CD8+CD45RO+ T cells in first-time vaccinees. In re-vaccinees, the CD3+ T cells increased from 50.7 percent (SE ± 3 percent) to 80 percent (SE ± 2.3 percent), CD4+ T cells from 24.9 percent (SE ± 1.4 percent) to 40 percent (SE ± 3 percent) presenting a percentage of 95 percent CD4+CD45RO+ T cells, CD8+ T cells from 19.7 percent (SE ± 1.8 percent) to 25 percent (SE ± 2 percent). Among CD8+CD38+ T cells there could be observed an increase from 15 to 41.6 percent in first-time vaccinees and 20.7 to 62.6 percent in re-vaccinees. Regarding neutralizing antibodies, the re-vaccinees presented high titers even before re-vaccination. The levels of neutralizing antibodies of first-time vaccinees were similar to those presented by re-vaccinees at day 30 after vaccination, indicating the success of primary vaccination. Our data provide a basis for further studies on immunological behavior of the YF 17DD vaccine.

Yellow fever virus isolated from a fatal post vaccination event: an experimental comparative study with the 17DD vaccine strain in the Syrian hamster (Mesocricetus auratus) / Vírus da febre amarela isolado de acidente pós-vacinal fatal: estudo experimental comparativo com a amostra vacinal 17DD em Syrian hamsters (Mesocricetus auratus)

In order to investigate the pathogenicity of the virus strain GOI 4191 that was isolated from a fatal adverse event after yellow fever virus (YFV) vaccination, an experimental assay using hamsters (Mesocricetus auratus) as animal model and YFV 17DD vaccine strain as virus reference was accomplished. The two virus strains were inoculated by intracerebral, intrahepatic and subcutaneous routes. The levels of viremia, antibody response, and aminotransferases were determined in sera; while virus, antigen and histopathological changes were determined in the viscera. No viremia was detected for either strain following infection; the immune response was demonstrated to be more effective to strain GOI 4191; and no significant aminotransferase levels alterations were detected. Strain GOI 4191 was recovered only from the brain of animals inoculated by the IC route. Viral antigens were detected in liver and brain by immunohistochemical assay. Histothological changes in the viscera were characterized by inflammatory infiltrate, hepatocellular necrosis, and viral encephalitis. Histological alterations and detection of viral antigen were observed in the liver of animals inoculated by the intrahepatic route. These findings were similar for both strains used in the experiment; however, significant differences were observed from those results previously reported for wild type YFV strains.

Visando investigar a possível patogenicidade do vírus isolado (GOI 4191) de um evento adverso fatal pela vacinação antiamarílica, realizou-se um ensaio experimental em Syrian hamsters (Mesocricetus auratus), usando-se a cepa vacinal 17DD como parâmetro. As amostras virais foram inoculadas por via intracerebral, intra-hepática e subcutânea. Nos soros foram determinados níveis de viremia, resposta imune e aminotransferases, e nas vísceras a presença de vírus, antígeno e lesões teciduais. Não se detectou viremia para as duas amostras, a resposta imune foi maior para GOI 4191, e as aminotransferases não apresentaram alterações compatíveis com danos hepáticos. Nos animais inoculados por via intracerebral o vírus foi recuperado somente a partir do cérebro, sendo o antígeno viral detectado, por imuno-histoquímica, no cérebro e fígado. Infiltrado inflamatório e corpúsculos acidófilos foram observados no fígado e lesões tipo encefalite viral no sistema nervoso central. Alterações histológicas e antígeno viral foram observados, também, no fígado dos animais infectados por via intra-hepática, e ausentes naqueles inoculados por via subcutânea. Os resultados foram similares para as duas amostras testadas, entretanto distintos daqueles relatados na literatura para cepas silvestres do vírus amarílico.

Fatal myeloencephalitis following yellow fever vaccination in a case with HIV infection.

A 53 year old physically healthy man, unaware of any immunocompromised condition developed rapidly fatal myelomeningoencephalitis following a live-attenuated yellow fever vaccination. He was found to have asymptomatic HIV infection with high viral loads and low CD4 counts. This is the first reported case of such an incidence in the world literature. It is strongly suggested that in countries where HIV infection is endemic, an HIV blood test should be performed prior to the yellow fever vaccination and the vaccine should not be given to those immunocompromised persons.